紫外可见分光光度计法自发明以来,在市场应用上有了快速的发展,特别是在相关学科发展的基础上,迫使分光光度计仪器技术的不断更新,功能越来越完备,光度法的应用也拓展了应用范围。
1852年,比尔(Beer)提出了分光光度的基本定律,即:液层厚度相等时,颜色的强度和呈色溶液的浓度成比例,因而为分光光度法的理论搭建了基础,这便是闻名的比尔朗伯定律。在1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将这个理论应用在定量分析化学领域,并设计出首台比色计。在1918年,美国国家标准局制造出首台紫外可见分光光度计。从此以后,紫外可见分光光度计技术逐步更新升级,具备了自动打印,自动记录,数字显示,微机控制等功能,紫外可见分光光度计在市场上应用范围也相断扩大。
一、紫外可见分光光度计原理
物质的吸收光谱原本上就是物质里的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量, 相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。因为不同物质具有各自不一样的分子、原子和不一样的分子空间结构,所以它们吸收光能量的状况也不同,所以,每一种物质就有其特有的、固定的吸收光谱的曲线,可依据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低来判断和测定这个物质的含量,这便是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间互相作用的有效方法。
紫外可见分光光度法的定量分析的根基是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定浓度的吸光度和它的吸收介质的厚度呈正比。
二、紫外可见分光光度计的应用
1、紫外可见分光光度计检定物质
依据吸收光谱图上的一些特征吸收,尤其是最大吸收波长虽ax和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。这点在药物分析上具备广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数加入其中,为药物分析提供了良好的方法。
2、与标准物及标准图谱对照
把分析样品和标准样品用一样的浓度配制在同一溶剂中,在相同条件下分别测定紫外可见吸收光谱。如果两者是同一类物质,则两者的光谱图应完全相同。若没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确、精密度高,并且要有相同的测定条件。
3、纯度检验
4、比较最大吸收波长吸收系数的一致性
5、氢键强度的测定
实验证实,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不一样,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂 。
6、推测化合物的分子结构
7、紫外可见分光光度计在反应动力学研究的应用
8、络合物组成及稳定常数的测定
9、在有机分析中的应用
有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学,它是在分析化学和有机化学的基础上发展起来的综合性学科。
文章来自:中国仪器网http://www.zg17.com/article-1744.html
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